1. מה כוללים מחקרים לא קליניים?
תְשׁוּבָה:ניסויים לא-קליניים כוללים מחקרים פרמקולוגיים, בדיקות רעילות כלליות, ניסויי טוקסיקוקינטיקה ופרמקוקינטיקה לא-קלינית, בדיקות רעילות רבייה, בדיקות גנוטוקסיות, קרצינוגניות ובדיקות אחרות (פוטוטוקסיות, תלות, רעילות אימונו) וכו'. במקרים של טיפול משולב, ניתן לערוך גם מחקרי בטיחות לא-קליניים של טיפול משולב. עבור חלק גבוה מסוים (יותר מ-10% מסך החשיפה המערכתית ורמת החשיפה במחקרים בבעלי חיים נמוכה מחשיפה בבני אדם), ייתכן שיהיה צורך לערוך מחקרי בטיחות לא קליניים של מטבוליטים.
2. מהי המטרה של הערכת בטיחות לא קלינית?
תְשׁוּבָה:מטרת הערכת הבטיחות הלא קלינית כוללת בדרך כלל הבהרת מאפייני תגובת רעילות הקשורים לאיברי מטרה, תלות במינון, קשרי חשיפה והפיכות פוטנציאלית. ניתן להשתמש במידע זה כדי להעריך את המינון ההתחלתי והמינונים הבטוחים עבור ניסויים קליניים בבני אדם (כפי שהוזכר קודם לכן, יש להשיג NOAEL בניסויים טוקסיקולוגיים לחישוב MRSD, המינון ההתחלתי המקסימלי המומלץ), וכדי לקבוע מדדי ניטור קליניים לתגובות לוואי אפשריות.
3. אילו מחקרים לא קליניים נדרשים לניסויים ראשונים-ב-בני אדם?
תְשׁוּבָה:לשאלה זו, תחילה יש צורך להבהיר את סוג התרופה. ICH M3 (R2) ישים למצבים נפוצים בפיתוח תרופות ומספק עקרונות הנחיות כלליות. עבור תרופות ביולוגיות, יש לערוך מחקרים לא-קליניים בהתאם לדרישות של ICH S6.
⑴פרמקוקינטיקה:לפני הגשת IND, מספיקים נתונים על חילוף החומרים של המוצר הנבדק במינים שונים ונתוני חילוף החומרים במבחנה בבני אדם, כמו גם קצב הקישור של חלבון פלזמה. יש להשלים מידע על ספיגה, הפצה, חילוף החומרים in vivo והפרשה לפני ניסויים קליניים בקנה מידה גדול (בדרך כלל שלב 3). ניסויי ספיגת PK נערכים בדרך כלל במינים מרובים לפני הגשת IND וקביעת PCC כדי להבין טוב יותר את מאפייני ה- PK של התרופה במינים שונים, אם כי זה לא נדרש כאן, וזה קצת מוזר.
⑵פרמקולוגיה בטיחותית:יש להשלים הערכה של ההשפעות על מערכת הלב וכלי הדם, העצבים המרכזיים והנשימה לפני הגשת IND, שהיא שילוב של בדיקות סטנדרטיות של פרמקולוגיה בטיחותית. ניסויים פרמקולוגיים בטיחותיים משלימים עשויים להתבצע במהלך ניסויים קליניים במידת הצורך.
⑶רעילות במינון חוזר:בדרך כלל, בדיקת רעילות כרונית לטווח קצר- מסודרת בהתבסס על סכימת המינון המוקדמת של IND. אם יש צורך להאריך את תקופת המינון מאוחר יותר, נדרשת-בדיקת רעילות כרונית לטווח ארוך יותר כדי לתמוך בה.
⑷גנוטוקסיות:עם עלות נמוכה יחסית, ניתן להשלים שילוב של בדיקת גנוטוקסיות לפני הגשת IND.
⑸קרצינוגניות:יש להשלים בדיקת קרצינוגניות לפני אישור התרופה.
⑹רעילות רבייה:תצפיות והערכות של מערכת הרבייה צריכות להיכלל בבדיקות רעילות במינון חוזר לפני הגשת IND כדי להעריך מראש את רעילות הרבייה, כאשר אמצעי מניעה קפדניים בניסויים קליניים מספיקים. יש להשלים מחקרי רעילות רבייה שלב I/II לפני -ניסויים קליניים בקנה מידה גדול, ויש להשלים מחקרי רעילות רבייה שלב III לפני האישור.
⑺רעילות פוטו:יש להשלים הערכת פוטורעילות לפני הגשת ה-IND. אם הספיגה הטוחנית גדולה מ-1000 M-1 ס"מ-1, קיים סיכון לפוטוטוקסיות, ויש לערוך בדיקות פוטו-רעילות לפני ניסויים קליניים בקנה מידה גדול.
4. כיצד יש לקבוע מינונים בבדיקות טוקסיקולוגיה? כיצד יש לבחור את המינון הגבוה ביותר?
תְשׁוּבָה:בהתייחס ל"עקרונות ההנחיות הטכניות לבדיקות רעילות במינונים חוזרים של תרופות", "באופן עקרוני, מינונים גבוהים צריכים לגרום לתגובות רעילות ברורות בבעלי חיים, מינונים נמוכים צריכים להיות שווים או גבוהים מהמינון היעיל בבעלי חיים או בשימוש קליני, ויש להגדיר מינונים בינוניים בין מינונים גבוהים למינונים נמוכים בהתבסס על מנגנון התגובה הרעיל ומאפיינים{0} של המינון הרעיל."
בפועל, בהתחשב בעלות היקרה של בדיקות טוקסיקולוגיה, ביצוע בדיקת-טווח מינונים (DRF) עם כמה פרימטים לא-אנושיים היא השיטה-היעילה והחוסכת ביותר-בעבודה. יש לקבוע עוד יותר את המינון לבדיקות DRF בהתבסס על מחקרי בטיחות ראשוניים שנערכו במהלך קביעת PCC מוקדמת ומחקרים תרופתיים. מוסדות רבים עורכים כיום גם בדיקות רעילות חריפות לצד בדיקות DRF, שהן בדיקות שאינן-GLP, כאמור ב-M3 (R2), בהתאם לעקרון 3R להפחתת השימוש בבעלי חיים.
עבור קבוצות במינון נמוך, בינוני וגבוה, בדרך כלל משתמשים במרווח של פי 2-3. בבדיקות טוקסיקולוגיה פורמליות, המצב האידיאלי הוא שקבוצת המינון הגבוה יכולה להפגין רעילות ברורה, וקבוצות המינון הנמוך או הבינוני יכולות לשמש כ-NOAEL.
בנוסף, לבחירת המינון הגבוה ביותר, M3 (R2) מספק גם תשובות סטנדרטיות. במילים פשוטות, המינון הגבוה ביותר ברוקסיקולוגיה צריך להיות המינון המקסימלי הנסבל (MTD) או המינון המקסימלי האפשרי (MFD, שניתן להבין כמינון המקסימלי שבעלי חיים יכולים לסבול בהתבסס על מאפייני המוצר ובעלי החיים), או שהוא צריך להשיג רוויה בחשיפה, או שרמת החשיפה צריכה להיות גבוהה מספיק (להגיע פי 50 מהמינון הקליני המיועד). באופן כללי, 1000 מ"ג/ק"ג ליום נחשב מספיק, אלא אם המינון הקליני המיועד מגיע ל-1 גרם ליום, ורמת החשיפה של 1000 מ"ג/ק"ג אינה מגיעה לפי 10 מרמת החשיפה הקלינית, ובמקרה זה עליך להגדיל עוד את המינון עד פי 10 מרמת החשיפה הקלינית, או 2000 מ"ג/ק"ג ליום, או MFD.
5. אילו מחקרים במחקר בטיחות לא קליני צריכים לבצע GLP, ואילו לא?
תְשׁוּבָה:מחקרים פרמקולוגיים ופרמקוקינטיים אינם צריכים לעקוב אחר GLP, בעוד שמחקרי בטיחות, גנוטוקסיות, רעילות רבייה ומחקרי רעילות במינונים חוזרים צריכים לעקוב אחר GLP.
6. כמה זמן משך מחקרי רעילות במינון חוזר לא קליני?
תְשׁוּבָה:דרישות משך הזמן לתמיכה בהתנהלות הניסויים הקליניים ואישור השוק שונות וצריכות להיות ספציפיות לתקופת המינון של הניסויים הקליניים. לדוגמה, עבור חולים עם טרשת נפוצה, תקופת הניסוי הקליני המינימלית המתוכננת היא שנתיים. לכן, בעת רישום חולי טרשת נפוצה לניסויים קליניים, נדרש מחקר רעילות כרונית של 6- חודשים ו-9- חודשים ללא- מכרסמים, וזה מספיק כדי לתמוך באישור השוק. עבור תרופות שאינן-אונקולוגיות, מחקר רעילות כרונית של 4 שבועות משמש בדרך כלל כדי לתמוך בתקופת מינון שאינה עולה על 4 שבועות עבור ניסויים קליניים הראשונים בבני אדם.
7. כיצד לבחור חיות ניסוי להערכת בטיחות לא קלינית?
תְשׁוּבָה:בדרך כלל, משתמשים בשני סוגים של בעלי חיים, מכרסמים עם חולדות הם הבחירה המועדפת, ומכרסמים לא- עם כלבי ביגל הם הבחירה המועדפת. כמובן, יש לעקוב גם אחר עקרונות ניתוח ספציפיים למוצר-. עבור מולקולות קטנות, בחירת המינים צריכה לשקול בעיקר את המאפיינים המטבוליים של המוצר הנבדק בבעלי חיים הדומים לבני אדם. ניתן להתייחס ל"בדיקת ניתוח וזיהוי של מטבוליטים של מוצרי חקירה בעכברי CD-1, חולדות SD, כלבי ביגל, קופי Cynomolgus ומיקרוזומים של כבד אנושי", בבחירת מינים בעלי מאפיינים מטבוליים הדומים לבני אדם, כלומר מינים בעלי כמויות וסוגים של מטבוליטים דומים לבני אדם. בנוסף, המינים שנבחרו צריכים להיות רגישים למוצר הנבדק. בהתבסס על ניסיון העבר, עבור תרופה מולקולה קטנה, המאפיינים המטבוליים שלה בכלבי ביגל עשויים להיות דומים לבני אדם אך עם חשיפה נמוכה.
