גורם קרישה XI (FXI) הוא אנזים המשתתף ביצירת קרישי דם ומווסת על ידי פקטור XIIa (FXIIa) וטרומבין. הפעלה מוגזמת של FXI עלולה להוביל למחלות פקקת, כגון אוטם שריר הלב, שבץ מוחי ופקקת ורידים. לכן, FXI הוא יעד פוטנציאלי לתרופה נגד-קרישה שיכולה למנוע ולטפל בפקקת עם סיכון מועט לדימום.
לאחרונה, מאמר מדעי שפורסם בכתב העת Nature Medicine דיווח על גילוי של נוגדן חדש נגד FXI, BJTJ-1837, שיכול לחסום ביעילות את ההפעלה של FXI ולהראות השפעות נוגדות קרישה ואנטי-טרומבוטיות חזקות מבלי להגביר את הסיכון לדימום. מחברי המאמר הם מ-Beijing TUO JIE Biopharmaceutical Co Ltd (BJTJ Biotech) ומבית החולים השלישי של אוניברסיטת פקין.
במאמר זה, Prisys, כארגון מחקר חוזים מקצועי (CRO), סיפקה שירות-איכותי של ניסויים בבעלי חיים עבור BJTJ-1837. Prisys פעל לפי הנחיות CFDA/AAALAC ותקני IACUC כדי להבטיח את התאימות והאנושיות של הניסויים בבעלי חיים.פריסיס ביצע את הניסויים הבאים בבעלי חיים:
השפעות של נוגדני FXI על aPTT, PT ו-TGA בפלזמה אנושית. (א) השפעות של BJTJ-1837 (n=3), MAA868 (n=2), AB023 (n=2), ו-BAY-1213790 (n=2) על aPTT בפלזמה אנושית. פלזמה אנושית הודגרה עם ריכוזים שונים של נוגדנים או PBS למשך 3 דקות ב-37 מעלות. לצורך מדידה, נוספו ריאגנטים aPTT, ונקבע זמן הקרישה. לצורך ניתוח נתונים, aPTT של קבוצת PBS הוגדר כ-100%, והריכוזים הסופיים של הנוגדנים נרשמו כנגד aPTT היחסי.∗P < .05,∗∗P < .01, לעומת BJTJ-1837. (ב) השפעות של BJTJ-1837 (n=2), MAA868 (n=1), AB023 (n=2), ו-BAY-1213790 (n=3) בריכוז של 50 ug/mL (למעט 33 ug/mL) על BAY-12mL בפלזמה אנושית. לצורך מדידה, נוספו ריאגנטים PT, ונקבע זמן הקרישה. לניתוח נתונים, PT של קבוצת PBS הוגדר כ-100%. נתונים מיוצגים ממוצע ± SEM. (ג) ההשפעה התלויה במינון של BJTJ-1837 על עיכוב יצירת תרומבינים. בבדיקה, יצירת הטרומבין הופעל על ידי ריכוזים נמוכים של גורם רקמה, ופעילות הטרומבין נמדדה על ידי הוספת מצע פלואורגני לפלסמה. ה-IC50 של BJTJ-1837 היה 4.14 ug/mL. aPTT, זמן טרומבופלסטין מופעל חלקי; F, גורם; PBS, מלוחים מלוחים בפוספט; PT, זמן פרוטרומבין; TGA, בדיקת יצירת תרומבינים.
מודל פקקת shunt עורקי (AV-shunt):מודל זה הוא מודל זהב להערכת ההשפעות האנטי-תרומבוטיות של תרופות, על ידי הקמת מעגל shunt ורידי עורקי מלאכותי בקופי cynomolgus ותצפית אם נוצר פקקת במעגל. Prisys השתמש במודל זה כדי לבדוק את ההשפעות של BJTJ-1837 במינונים שונים על היווצרות פקקת AV-שאנט בקופי cynomolgus והשוואה לתרופות נוגדות קרישה משווקות. התוצאות הראו ש-BJTJ-1837 יכול להפחית משמעותית את המשקל של פקקת AV-shunt ולהאריך את זמן הדימום באופן-תלוי במינון. בהשוואה לתרופות אחרות נגד קרישה, ל-BJTJ-1837 היו השפעות אנטי-טרומבוטיות חזקות יותר וסיכון נמוך יותר לדימום.
מדידת זמן דימום:שיטה זו היא שיטה נפוצה להערכת נטיית הדימום והתפקוד ההמוסטטי, על ידי חיתוך פצע בגודל -סטנדרטי על הזנב או האוזן של החיה והתבוננות בזמן הדימום בפצע. Prisys השתמש בשיטה זו כדי לבדוק את ההשפעות של BJTJ-1837 במינונים שונים על זמן הדימום בקופי cynomolgus והשוואה לתרופות אנטי-קרישה משווקות. התוצאות הראו כי BJTJ-1837 יכול להאריך את זמן הדימום באופן תלוי מינון, אך ההארכה הייתה קטנה ולא התרחש דימום חמור או קטלני. בהשוואה לתרופות נוגדות קרישה אחרות, ל-BJTJ-1837 הייתה בטיחות ושליטה טובה יותר.
BJTJ-1837 הוכיח יעילות ובטיחות במחקר רעילות תת-חריפה בקופי cynomolgus. שני קופים (מקבוצת 1.5 מ"ג/ק"ג ו-3 מ"ג/ק"ג לאחר תקופת כביסה של חודש אחד) קיבלו פעמיים מינון של 30 מ"ג/ק"ג ביום 1 וביום 14. aPTT (A) ו-PT (B) נמדדו בנקודות זמן שונות. דגימות הדם נאספו עם צינור איסוף דם ואקום המכילה טריסודיום ציטראט בנקודות הזמן המצוינות לאחר מינון הנוגדנים. הדגימות בוצעו בצנטריפוגה של 1500 גרם למשך 15 דקות בטמפרטורת החדר ונאספה פלזמה לצורך בדיקות. לניתוח נתונים, aPTT או PT של מינון מוקדם הוגדרו כ-100%. הערכים היו ממוצעים ± SEM.∗P < .05 לעומת שליטה. aPTT, זמן טרומבופלסטין מופעל חלקי; ns, לא משמעותי; PT, זמן פרוטרומבין
ניתוח היסטופתולוגי:שיטה זו היא שיטה להערכת הרעילות והנזק הפוטנציאליים של תרופות על איברים ורקמות של בעלי חיים, על ידי ניתוח פגרי החיות, הוצאת איברים ורקמות שונים, ביצוע חתכים וביצוע תצפית וצביעה מיקרוסקופית. Prisys השתמש בשיטה זו כדי לבצע ניתוח היסטופתולוגי בקבוצת הטיפול ב-BJTJ-1837 ובקבוצת הביקורת של קופי cynomolgus והשוואה לתרופות נגד קרישה משווקות. התוצאות הראו כי BJTJ-1837 לא גרם לשום חריגה ברורה או נזק לאיבר או רקמה כלשהי. בהשוואה לתרופות אחרות נגד קרישה, ל-BJTJ-1837 היו רעילות ותופעות לוואי נמוכות יותר.
לסיכום,Prisys סיפקה שירות ניסויים בבעלי חיים-איכותי עבור BJTJ-1837, שסיפק נתונים אמינים והוכחות להערכת ההשפעות האנטי--אנטי קרישה ואנטי-טרומבוטיות שלו.ל-Prisys ניסיון עשיר וצוות מקצועי בניסויים בבעלי חיים, שיכולים לספק ללקוחות שירות ניסויים בבעלי חיים יעיל,-איכותי וחסכוני-. Prisys מצפה לשתף פעולה עם חברות ביו-פארמה נוספות כדי לקדם במשותף את המחקר והפיתוח והשיווק של תרופות חדשות.
BJTJ-1837, נוגדן חדשני חוסם הפעלה FXI,https://doi.org/10.1016/j.rpth.2023.100067
