מבחני אימונוגניותחיוניים בפיתוח תרופות קליניות, במיוחד עבור מוצרים ביו-תרפיים. למרות ההתמקדות הרגולטורית בדרישות קליניות, הערכת אימונוגניות לא קלינית נותרה קריטית בנסיבות ספציפיות. לפי ICH S6, יש להעריך אימונוגניות לא-קלינית כאשר יש שינוי משמעותי בפעילות הפרמקודינמית או כאשר החשיפה לתרופה משתנה ללא סמנים פרמקודינמיים או אינדיקטורים של תגובה חיסונית-מתווכת.
קונצנזוס מינימלי לאסטרטגיה על ידי הפורום האירופי לביואנליזה (EBF)
ה-EBF הקים קבוצת עבודה ב-2016, שהביאה לקונצנזוס על אסטרטגיות מינימליות להערכת אימונוגניות לא קלינית. פרמטרים מרכזיים כוללים הערכת SCP, רגישות, סבילות לתרופות ודיוק:
1. חתוך-ערכים:עבור ספי סקר, מומלץ שיעור חיובי כוזב (FPR) של 0.1-1% ללא בדיקת אישור. FPR של 0.1% מסייע לא לכלול תוצאות חיוביות כוזבות ליד אות SCP, ומזהה למעשה תגובות חיסוניות רלוונטיות לא קליניות. תוך הקפדה על עקרון ה-3R, ניתן לקבוע את ה-SCP באמצעות פחות דגימות בודדות, באופן אידיאלי 15-30, יצירת 60 נקודות נתונים (למשל, 30 דגימות מנותחות פעמיים או 15 דגימות מנותחות ארבע פעמים). אישור FPR מדגם לפני מינון מיותר בשל הרלוונטיות הלא-קלינית המוגבלת שלו.
2. רגישות:יש להעריך את הרגישות בתוך אצווה ניתוח אחת. ה-MRD צריך להיות באופן אידיאלי מתחת ל-100, עם רגישות מתחת ל-1000 ng/mL. על פי הנחיות NMPA 2021, הרגישות צריכה להגיע ל-250-500 ng/mL, כאשר רגישות מתחת ל-100 ng/mL עדיפה אם אפשר להשיג. ניתן להגדיר את ריכוז ה-LPC ליד פי 2-3 מהאות SCP ללא ניתוח סטטיסטי מקיף.
3. דיוק:יש להעריך את הדיוק על פני שלוש קבוצות ניתוח, שכל אחת מהן כוללת שש סטים של בקרות חיוביות שהוכנו באופן עצמאי בשלוש רמות ריכוז (HPC, MPC, LPC) ושש סטים של בקרות שליליות (NC).
4. רמות סובלנות לתרופות:יש להעריך סבילות לתרופות ברמות LPC (או 1000 ng/mL בקרה חיובית), על מנת להבטיח שהשיטה יכולה לזהות ADA ברמות התרופה הצפויות במחקרים לא קליניים.
פרמטרי אימות אופציונליים כוללים סלקטיביות, ספציפיות, טיטרים ויציבות, המותאמים לצרכי הפרויקט האישי.
התמודדות עם אתגרי התעשייה
"אסטרטגיית המינימום" עומדת בפני אתגרי יישום מעשיים, במיוחד בשל ההסתמכות ארוכת השנים של התעשייה על הדרכה קלינית למחקרי אימונוגניות לא-קלינית. לדוגמה, התעשייה מהססת לעתים קרובות לאמץ אסטרטגיות כמו "הקרנה רק עם 0.1-1% FPR ללא בדיקות אישור". אף על פי כן, הגדרת ערכי חיתוך, רגישות, סבילות לתרופות ודיוק נותרה חיונית.
המלצות למבחני אימונוגניות לא קליניים
בהתחשב בחוסר המוכר של תרגום בין נתונים לא-קליניים לקליניים, ה-EBF מייעץ לדברים הבאים:
1. הערכת מקרה-לפי-מקרה:הערכות אנטי--נוגדניות לא-קליניות (ADA) צריכות להתבסס על רציונל מדעי ושימושיות נתונים, במקום להיות דרישת ברירת מחדל.
2. מחקרים פרמקוקינטיים/פרמקודינמיים (PK/PD):מחקרים אלו, שנערכו לפני טוקסיקולוגיה של GLP, עשויים לספק תובנות לגבי תגובות חיסוניות אך יש להם ערך מוגבל.
3. לימודי טוקסיקולוגיה:המטרה העיקרית היא להדגים חשיפה מספקת ולהעריך את הפתולוגיות הנובעות מהן ואת הפיכותן, תוך הגדרת רמות חוסר השפעה ושולי בטיחות לשימוש קליני. ADA עשוי להשפיע או לא להשפיע על TK/PD או לגרום לפתולוגיות שנצפו.
4. קבלת החלטות:הסבירות ליצירת תגובה חיסונית in vivo צריכה להנחות את פעילויות פיתוח המבחנים, איזון סיכונים עסקיים ולוחות זמנים של חסות.
גישות אסטרטגיית אימונוגניות:
- דגימות בנק ופיתוח/אמת מבחני רק אם נצפו השפעות TK/PD והבטיחות.
- פתח מבחנים והתחל אימות/בדיקות על השפעות שנצפו על TK/PD ובטיחות.
- לפתח ולאמת מבחני באופן יזום על סמך סיכונים ומשאבים עסקיים.
ניתן לנקוט בגישה רזה לאימות מבחן, הימנעות מהדרישות המלאות של מבחנים קליניים ויישום עקרונות 3R. מבחני סקר עם נקודות חיתוך מחמירות (0.1-1% FPR) או גישות אות/רעש יכולות להספיק לניתוח מדגם.
על ידי אימוץ אסטרטגיות אופטימליות אלה, הערכת האימונוגניות הלא-קלינית יכולה להיות יעילה יותר ולהתאים לציפיות המדעיות והרגולטוריות, ובסופו של דבר לשפר את הפיתוח של מוצרים ביו-תרפיים.
