ניתוח נוזל מוחי (CSF) הוא כלי רב עוצמה לשיפור הזיהוי של תהליכים שונים המתרחשים במערכת העצבים המרכזית, כגון דימום, דלקת, זיהום, גידולים ומצבים קליניים אחרים. בנוסף, הערכות סדרתיות של תרכובות ב-CSF (כגון הורמונים, תרופות, נוירוטרנסמיטורים, סמנים ביולוגיים, מטבוליטים ווירוסים) חיוניות באותה מידה הן במחקר הבסיסי והן במחקר התרגום. נפח CSF במערכת העצבים המרכזית נשמר יציב באמצעות הפרשה וספיגה.
I. שיקולים תפעוליים
CSF נאסף בדרך כלל באמצעות חדר מוחי או ניקור מותני. ניקור מותני טומן בחובו סיכון נמוך יחסית לסיבוכים בפרימטים שאינם-אנושיים מכיוון שברוב המינים, אתר הדקירה המותני מרוחק מקצה חוט השדרה. יש צורך בהרדמה נכונה ובטכניקות אספטיות, לרבות הכנת האתר כגון גילוח ושימוש בחומרים סטריליים. יש להשתמש לפחות בכפפות, מזרקים ומחטים סטריליות, תוך התחשבות בווילונות ניתוחיים סטריליים. איסוף CSF מבוצע בדרך כלל בשכיבה לרוחב, בשכיבה בחזה או בישיבה, שיפור הגישה לחדרי המוח או הגדלת החלל הבין חולייתי באמצעות כיפוף של הצוואר או עמוד השדרה. הגודל והאורך של המחט הנבחרת צריכים להתאים למין ולגודל של פרימטים לא-אנושיים. הטכניקות, הציוד, החומרים המתכלים המשמשים במהלך ההליך והטיפול הניתוחי משתנים בהתאם למין, למטרות המחקר ולהעדפות הווטרינר הקליני.
פרוטוקולי מחקר מסוימים עשויים לדרוש איסוף מתמשך של CSF לאורך זמן או איסוף של דגימות CSF מנבדקים לא מורדמים. עבור פרוטוקולים אלה, ניתן להשיג איסוף מתמשך של CSF מקופי רזוס ערים באמצעות צנתרי CSF מושתלים-לטווח ארוך המחוברים ליציאות איסוף תת עוריות.
המחבר עשה כל מאמץ למצוא את ההפניות העדכניות ביותר לגבי נפח CSF הכולל, מגבלות או המלצות לדקירות דורליות, תדירות איסוף, נפח נסיגה בטוחה ושיעורי חידוש CSF. הספרות על היבט זה מוגבלת לרוב הפרימטים הלא-אנושיים. בנוסף, שיטות האיסוף משתנות, שכן סקרים של חברי האיגוד הווטרינרי הווטרינרי הלא-Human Primate מצביעים על כך שמוסדות שונים משתמשים בהצלחה בשיטות שונות לאיסוף CSF. לכן, המחבר מספק שיקולים והמלצות לאיסוף CSF בהתבסס על העדויות הטובות ביותר הקיימות.
לצורך התייחסות, מחקרים קודמים קבעו שנפח CSF לכאורה בקופי רזוס זכרים בוגרים (8.0-10.6 ק"ג) הוא 10+/-0.06 מ"ל, עם קצב זרימת CSF של 0.018+/-0.003 מ"ל/דקה. קצב היווצרות CSF בקופי רזוס נע בין 28.6-44.2 μL/דקה. דרוש מחקר נוסף על פרימטים לא אנושיים בתחום זה כדי להקל על פיתוח המלצות מאלפות יותר.
II. תופעות לוואי אפשריות
למרות שסיבוכים במהלך איסוף CSF בפרימטים שאינם-אנושיים הם נדירים, שינויים אנטומיים ושיטות טכניות לא נאותות או לא מתאימות עלולות להוביל לנזק או לסיבוכים לדגימה כגון דימום, פריצות, זיהום, נזק לגזע המוח, חוט השדרה או שורשי העצבים ואי נוחות של בעלי חיים. בעוד שסיבוכים אלו נדירים, הם עלולים לפגוע ברווחת בעלי החיים.
בשל הסיכונים הכרוכים בכך, יש לאסוף CSF על ידי וטרינר או צוות וטרינרי מיומן. עבור ניסיונות לא מוצלחים לאיסוף CSF, שיטות העבודה עשויות להשתנות. מקובל לאפשר עד שלושה ניסיונות לא מוצלחים על ידי אדם אחד. לאחר הניסיון השלישי הלא מוצלח, אדם מוסמך אחר צריך להשתלט עליו. אם האדם השני אינו מסוגל לאסוף CSF לאחר שלושה ניסיונות, יש להפסיק את הניסיונות. בינתיים החיה תקבל טיפול משכך כאבים מתאים ותבריא מהרדמה. שינוי אתר האיסוף (למשל, מחדרי מוח למותניים) לאחר ניסיונות לא מוצלחים מביא לרוב להצלחה. אם מתרחש ניסיון כושל ללא הנחיית הדמיה, ניתן להשתמש בהנחת מחט בעזרת פלואורוסקופיה-. מלבד הגדלת אחוזי ההצלחה, הנחיית תמונה יכולה גם להפחית את שיעור הדקירות הטראומטיות.
הניטור לאחר הניתוח צריך להימשך עד שהחיה חוזרת לכלוב שלה ויכולה לשמור על יציבה זקופה ללא תמיכה. ניטור בעלי חיים צריך להימשך לפחות 24 שעות או על פי הפרוטוקול שאושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC). הניטור צריך לכלול הערכות של פרמטרים פיזיולוגיים, התנהגותיים ותנועתיים בסיסיים. יש להעריך במיוחד סימנים של חוסר תפקוד נוירולוגי, כולל אך לא רק עייפות, דיכאון, תרדמת וסימנים של לחיצת ראש. כאבי ראש ויתר לחץ דם תוך גולגולתי בעקבות איסוף CSF אינם נדירים ברפואת האדם. בהתחשב בסיבוך הפוטנציאלי הזה בפרימטים שאינם-אנושיים, יש לספק טיפול משכך כאבים במהלך הניתוח ולהמשיך 2-3 ימים לאחר הניתוח, או לפי הצורך בהתבסס על תצפיות לאחר הניתוח הקשורות להתנהגויות הקשורות לכאבי ראש או כאבי עמוד שדרה. משטר משכך הכאבים היעיל ביותר עשוי להיות כרוך בטיפול מקיף ההתחלתי לפני הניתוח.
III. שיקולי IACUC ושמירת תיעוד
על ה-IACUC להכיר את ההליכים הקשורים לאיסוף CSF ואת כל הסיבוכים האפשריים ולבדוק אותם לפחות מדי שנה. יש לתאר את כל המידע הרלוונטי, כגון מינוני תרופות, הכנות לפני ניתוח, נפחי CSF שנאספו, תדירות האיסוף וההחלמה שלאחר הניתוח-קצרה וארוכה-ארוכה בפרוטוקול IACUC ולתעד כראוי בתיעוד רפואי או ביומני מעבדה.
בעוד CSF עשוי להיות נתונים מכריעים בפרוטוקולי מחקר, טכניקות איסוף לא נאותות עלולות להשפיע על רווחת בעלי החיים. בעת הגשת פרוטוקולים, יש לספק נימוק מדעי למספר ותדירות האוספים. באופן ספציפי, ה-IACUC צריך להעריך בקפידה כל הצעה הכרוכה באיסוף CSF ולשקול את הדברים הבאים:
1. האם איסוף CSF חיוני להשגת היעדים המדעיים המפורטים בפרוטוקול?
2.האם קיימות שיטות חלופיות ושיטות הערכה פחות פולשניות של מערכת העצבים המרכזית (כגון טכניקות הדמיה), ואם כן, האם נשקלו?
3.האם המפעילים קיבלו הכשרה מתאימה ובעלי כישורים מספקים?
4.האם יינתנו משטרי הרדמה ומשככי כאבים מתאימים? יש לפנות לייעוץ עם וטרינרים של חיות מעבדה לגבי תוכניות הרדמה ומשככי כאבים.
5.האם נפח CSF שנאסף מתייחס לגיל וגודל החיה?
6.האם מספר ותדירות הדקירות הדוראליות מתאימים לבעל החיים, והאם הסיכון לסיבוכים הצטמצם? אם מספר אוספי CSF הם חלק מהמחקר, יש לציין את זמני האיסוף המרביים עבור כל חיה.
7. האם תוכנית הניטור לאחר הניתוח מתאימה?
8. האם נשקלו כל הסיבוכים האפשריים לאחר הניתוח, והאם כל ההתערבויות הסבירות, כולל המתת חסד, נרשמו?
