פקקת AV shunt ב-NHPs: פענוח זרימה, פקקת ודימום
כמות הקריש שהתאוששה בסוף מחקר פקקת shunt arteriovenous (AV) היא קריאה אחת מבין כמה. ב אדגם AV shunt non-human primate (NHP)., דם זורם דרך קטע בדיקה חוץ גופי מוגדר תחת זרימה. ההגדרה תומכת בהערכה של התנהגות זרימה והיווצרות פקקת על משטח הנוגע בדם, ונקודות קצה משלימות של דימום דם מתארות את הצד הבטיחותי של תגובה אנטי-טרומבוטית.
מדידות אלו עונות על שאלות שונות. זרימה מציינת אם הפקקת המתפתחת משפיעה על סבלנות. עומס פקקת מתאר חומר שהופקד על מקטע הבדיקה או בתוכו.דימום והמוסטזיסמדדים מראים אם עיכוב של פקקת מגיע עם השפעה מוגזמת על דימום רגיל. אין נקודת קצה אחת המכסה את כל שלושת המימדים של הפרמקולוגיה.
מה מודד דגם ה-AV shunt
דגמי פקקת shunt AVלמקם מכשיר בדיקה או קטע שתל במעגל שחושף אותו לדם זורם. מגע עם משטח זר, גיאומטריה מקומית ושדה הזרימה המתקבל מתחילים הידבקות והפעלה של טסיות דם, קרישה ויצירת פיברין. האיזון בין התהליכים הללו תלוי במאמר הבדיקה, בחומר פני השטח, בגיאומטריית המכשיר ובתנאים ההמודינמיים, כמו גם במצב ההמטולוגי הבסיסי של החיה.
עבודה היסטורית ביססה את ההיתכנות של מדידת היווצרות פקקת בקופי רזוס באמצעות מכשירי בדיקה שנחשפו לדם ב-shunts arterioarterial או arteriovenous. במחקר אחד, פקקת שהופקדה במהלך חשיפה מוגדרת כמתה באופן גרבימטרי; הגיאומטריה והחומר של המכשיר השפיעו על הכמות שהוחזרה, והחוקרים דיווחו על זרימה צפויה יותר ב-AV מאשר בתצורה העורקית.[1] מחקר קשור השתמש במודל כדי להשוותתרופות אנטי-תרומבוטיותושילוב של מדידת פקקת גרבימטרית עם הערכה אולטרה-סטרוקטורלית.[2] מחקרים אלה מספקים הוכחה עקרונית, לא פרוטוקול מוכן או טווח התייחסות אוניברסלי למחקר NHP עכשווי.
התייחסו למודל כאתגר טרומבוגני מבוקר וחריף שנבנה סביב זרימת דם ומשטח מוגדר המגע עם דם. הוא אינו משחזר כל תכונה של פקקת עורקים או ורידים ספונטניים בחולים. אין לקרוא נקודת קצה הקשורה לקריש במכשיר כפרוקסי ישיר לקרע פלאק, תרומבואמבוליזם ורידי, שבץ מוחי, אוטם שריר הלב או כשל קליני בשתל.
שלושה תחומים של נקודות קצה, ומדוע הם צריכים להישאר שונים
1. סבלנות זרימה ו-shunt
זרימה היא קריאה פונקציונלית של האינטראקציה המתפתחת בין פקקת למעגל הבדיקה. בהתאם לתכנון המחקר, סיכומים שימושיים כוללים את פרופיל הזרימה הבסיסית והסדרתית, השינוי מקו הבסיס, זרימה לאורך זמן או זמן להפחתת זרימה או הפרעה שנקבעה מראש. אם הזרימה מנוטרת באופן רציף, הנתונים מראים מתי מתחיל שינוי והאם הוא מתמשך, מידע שמדידה סופנית לבדה לא יכולה לספק.
יש לפרש את הזרימה ביחס למערכת המדידה. מיקום הבדיקה, התנגדות המעגל, ממדי המכשיר, תנאי הלחץ, הטמפרטורה וההפרעות הטכניות משפיעים על האות המוקלט. פרוטוקול צריך להגדיר את טווח הבסיס המקובל, כיצד מטופלים חפצי אותות ומה מהווה הפחתה ניתנת לפירוש בזרימה לפני השוואה בין קבוצות הטיפול. "זמן לחסימה" הוא בעל משמעות רק כאשר הסף וחלון התצפית מוגדרים מראש והמודל מגיע באופן מהימן לאותו אירוע בתנאים שנבחרו.
מסת פקקת נמוכה יותר לא מוכיחה שהזרימה נשמרה, וזרימה שמורה לא מוכיחה שנוצר פקקת קטנה. פיקדון לא חוסם מצטבר ללא שינוי זרימה פתאומי; פיקדון במיקום אסטרטגי פוגע בזרימה למרות מסה כוללת צנועה. עומס זרימה ופקקת הם נקודות קצה משלימות, ואינן מחליפות את השנייה.
2. עומס פקקת והרכב
הערכת פקקת סופנית מכמתת את החומר שנוצר על מקטע הבדיקה או בתוכו. מדידה גרבימטרית היא גישה ישירה ומבוססת בספרות הפרימטים ההיסטורית, אך התוצאה תלויה בהתאוששות, טיפול ושקילה סטנדרטיים. הפרוטוקול צריך לציין אם נקודת הסיום הנמדדת היא רטובה או מסה מעובדת, כיצד מטפלים בשאריות הדם והאם התוצאות מנורמלות למאפיין מכשיר רלוונטי כגון אזור חשוף או משך חשיפה. בחירות אלה חייבות להיות עקביות בין הקבוצות ולדווח באותו אופן.
המסה לבדה אינה חושפת מה מכיל הפקקת או כיצד הוא נוצר. כאשר הצדקה מדעית, הדמיה או מיקרוסקופיה והערכה ממוקדת של רכיבי טסיות ופיברין מוסיפים הקשר מכניסטי. ניתוחים כאלה עוזרים להבחין בין שינוי בתצהיר הכולל משינוי בתרומה היחסית של חומר עשיר בטסיות ועשיר בפיברין. הגדירו מראש את השיטה, מיקום הדגימה וגישת הניקוד, והתייחסו לקריאת מורפולוגיה חקרנית כאל חקרנית עד להסמכה.
ערכת נקודות קצה שימושית מקשרת את התצפית בתוך המעגל לדגימה המשוחזרת: מסלול זרימה במהלך החשיפה, כמות הפקקת בנקודת הקצה, ואם כלולים, אפיון הרכב הפקקת. רצף זה נותן קריאה מלאה יותר ממשקל טרמינלי בודד.
3. דימום והמוסטזיס
פעילות אנטי-טרומבוטית ואיתההשפעות על דימום דםשייכים לאותו ניתוח. מחקר משלב בדרך כלל תצפיות קליניות של דימום, הערכת גישה או אתרים פרוצדורליים, מדידת דימום מוגדרת בפרוטוקול ונתוני מעבדה או פרמקודינמיים הרלוונטיים למנגנון התרופה. הפאנל המדויק עוקב אחר מאמר הבדיקה ושאלת המחקר במקום תבנית שהועתקה ממין אחר או משיעור פרמקולוגיה.
זמן דימום, כאשר נעשה בו שימוש, הוא מדד תלוי הקשר המושפע מהשיטה ומהביצוע; זה לא הערכה ישירה של הסיכון לדימום קליני. כמו כן, בדיקות קרישה שגרתיות, ספירת טסיות או מבחני תפקוד טסיות כל אחת לוכדות רק חלק מהמוסטזיס ואינן רגישות באותה מידה לכל מנגנון. הפרשנות חזקה יותר כאשר תצפיות משולבות עם חשיפה ונתונים פרמקודינמיים, כגון בדיקת הקרישה הרלוונטית או מסלול הטסיות, במקום להתייחס לכל תוצאת מעבדה בודדת כמסקנת בטיחות מלאה.
נקודות קצה של דימום דורשות גם גישה סטנדרטית וארווחת בעלי חייםסקירה ב-NHPs. הפרוטוקול צריך לציין כיצד נצפים ומדרגים אירועים, תקופת התצפית הרלוונטית, קריטריונים למעקב או התערבות וכיצד מובחן דימום פרוצדורלי לאות הקשור לתרופה. ממצא של פקקת מופחתת ללא דימום מזוהה במחקר קטן אינו תומך בטענה של "אין סיכון לדימום".
בנו חבילת נקודת קצה סביב שאלת הפרמקולוגיה
בחירת נקודת הקצה באה בעקבות ההחלטה המיועדת. תוכנית נוגדת טסיות זקוקה בדרך כלל להשקעת טסיות או לתפקוד, זרימה והערכת דימום. תוכנית נוגדת קרישה מפעילה את הפרמקודינמיקה והחשיפה של נתיבי הקרישה, שהופכים את השינוי בהיווצרות הפקקת לפירוש. מכשיר לשינוי פני השטח שם את הדגש על שקיעה ספציפית לחומר ואפיון פני השטח. בכל מקרה, נקודות הקצה נעות למנגנון הפעולה ולגבולות המודל.
מחקר shunt AV קוהרנטי מיישר בדרך כלל ארבעה זרמי מידע:
- תגובה פונקציונלית:התנהגות זרימה וכל פטנט או מדד חסימה מוגדרים מראש.
- תגובת פקקת:כמות שהופקדה, כאשר הרכב או מורפולוגיה מוערכים כאשר מוצדק.
- פַרמָקוֹלוֹגִיָה:חשיפה של מאמר למבחן ומדידות פרמקודינמיות רלוונטיות למנגנון בנקודות זמן הניתנות לפירוש.
- הקשר המוסטטי:תצפיות דימום קליניות ואמצעים מעבדתיים או תפקודיים נבחרים המתאימים למועמד.
תוכנית הניתוח צריכה לזהות את נקודת הקצה העיקרית ולהבחין בינה לבין אמצעים תומכים או גישושים. אקראית, הערכה עיוורת במידת האפשר, תנאי בקרה,הצדקה בגודל מדגםוטיפול מוגדר מראש בכשלים טכניים מפחיתים את אי הוודאות הפרשנית. כאשר נשקלת חשיפה חוזרת או השוואות בתוך בעלי חיים, התכנון חייב לקחת בחשבון את ההעברה, ההדחה והשונות הביולוגית של נקודות הקצה שנבחרו.
מקורות לשונות שמשנים את התוצאה
תוצאת פקקת shunt AV היא ספציפית לתצורת הניסוי. החומר והגיאומטריה של המכשיר, שטח הפנים החשוף, ממדי המעגל, תנאי הזרימה, משך החשיפה וניהול הפרוצדורלי - כולם משפיעים על היווצרות פקקת. גורמים ביולוגיים, לרבות ספירת טסיות ותפקוד, המטוקריט, מצב קרישה, מינים, שונות אינדיבידואלית ותרופות נלוות, משפיעים אף הם על התגובה.
גורמים אלה אינם רק פרטים טכניים. אם הם שונים בין קבוצות או תקופות מחקר, הם משנים את השפעת הטיפול הנראית לעין. המטולוגיה בסיסית, הכנה וטיפול עקביים במכשיר, מדידת זרימה מכוילת, סטנדרטיזציה פרוצדורלית ותיעוד מלא הם חלק מתוקפות נקודת הקצה. פרוטוקול צריך גם להגדיר כיצד הפרעה בלתי צפויה של זרימה, כשל במכשיר או היווצרות פקקת לא מספקת יירשמו ויטפלו בניתוח.
ההקשר של NHP מוסיף ערך כאשר המחקר דורש הערכה משולבת in vivo של חשיפה, פרמקולוגיה ותגובה המוסטטית בפרימאט. זה לא מבטל את הצורך בהסמכת דגם. מחקרי רזוס היסטוריים מראים ש-AV shunts תומכים במחקרים של יצירת פקקים והשפעות אנטי-טרומבוטיות, אך הם אינם קובעים כי התוצאות עוברות ללא שינוי למין אחר, לתצורת מכשיר, למחלקת תרכובות או למסגרת מחקר עכשווית.[1,2]
פרשנות תרגום: פרופיל תועלת-סיכון
מסקנה שמועמד "הפחתת פקקת" אומרת מעט בפני עצמה. השאלות הן האם ההפחתה הופיעה בזרימה, בנטל הפקקת או בשניהם; האם עקבה אחר חשיפה לתרופות והמנגנון הפרמקודינמי הצפוי; ומה מראים נתוני הדימום על אותו טווח חשיפה. אי התאמה בין נקודות הקצה היא אינפורמטיבית, ובדרך כלל משקפת הבדלים ברגישות, בתזמון, במיקום הקריש או במנגנון במקום ניסוי כושל.
מודל פקקת shunt NHP AV תורם להערכה פרה-קלינית של פרמקולוגיה אנטי-טרומבוטית כאשר התצורה ונקודות הקצה שלו מותאמות להחלטה העומדת על הפרק. כוחו טמון בהכנסת זרימה, פקקת מכשיר ופרמקולוגיה מערכתית להקשר ניסיוני אחד. הגבולות שלו חשובים לא פחות: זהו מודל אקוטי ותלוי תצורה ואינו יכול לבדו לבסס יעילות קלינית, סיכון קליני לדימום או תועלת טיפולית באוכלוסיית חולים ספציפית.
עבור צוותי תרגום, העדיפות המעשית היא להגדיר את השאלה תחילה, ולאחר מכן לבחור נקודת קצה זרימה, נקודת קצה פקקת וחבילת דימום המיועדת לקריאה יחד. התאמה זו, לא מספר המדידות, קובעת אם המחקר מייצר ראיות רלוונטיות להחלטה.
שאלות נפוצות
ש: מה מודד מודל פקקת shunt NHP AV?
ת: הוא מעריך היווצרות פקקת על או בתוך מקטע מוגדר של בדיקת מגע עם דם תחת זרימה ב-NHP. בהתאם לפרוטוקול, נקודות הסיום כוללות התנהגות זרימה, עומס פקקת התאושש, הרכב פקקת, חשיפה לתרופות, פעילות פרמקודינמית והשפעות המוסטטיות.
ש: למה למדוד זרימה כמו גם מסת פקקת?
ת: זרימה מתארת סבלנות תפקודית במהלך הניסוי, בעוד שמסת הפקקת מכמתת חומר שהופקד בנקודת הסיום של האיסוף. המדדים קשורים אך אינם ניתנים להחלפה: פקקת לפעמים מצטברת ללא חסימה, וקריש קטן הממוקם אסטרטגית משפיע על הזרימה באופן לא פרופורציונלי.
ש: האם עומס פקקת נמוך יותר אומר סיכון נמוך יותר לדימום?
ת: לא. יעילות אנטי-טרומבוטית ודימום הם תחומים פרמקולוגיים קשורים שיש למדוד בנפרד. מחקר צריך לכלול הערכת דימום מותאמת למנגנון, והפחתה בנטל הפקקת לבדה אינה מבססת היעדר סיכון לדימום קליני.
ש: האם תוצאות shunt AV יכולות לחזות תוצאות פקקת קליניות?
ת: הם מספקים עדויות פרה-קליניות לגבי פעילות אנטי-טרומבוטית בתצורת מכשיר וזרימה מוגדרת. הם, כשלעצמם, אינם מנבאים תוצאות קליניות או משחזרים את כל המנגנונים של פקקת עורקים או ורידים ספונטנית.
הפניות
- מייסון RG, וולף RH, צוקר WH, Shinoda BA.מודל shunt וסקולרי פרימטים לא אנושי ליצירת פקקים.חקירת מעבדה. 1976;34(6):558-564.PubMed PMID: 819713.
- מייסון RG, וולף RH, צוקר WH, Shinoda BA, Mohammad SF.השפעות של תרופות אנטי-טרומבוטיות שהוערכו במודל shunt כלי דם לא אנושי של פרימטים.American Journal of Pathology. 1976.PubMed PMID: 820202; טקסט מלא.
